Consultar: Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas (Biologia Celular)

Título [PT]: Ultra-estrutura e citoquímica dos túbulos de malpighi de larvas de diatraea saccharalis (Lepidoptera: Crambidae) não parasitadas e parasitadas por cotesia flavipes (Hymenoptera : Braconidae)
Autor(es): Gislei Maria Rigoni
Palavras-chave [PT]:

Diatraea saccharalis. Túbulos de malpighi. Cotesia flavipes. Insetos. Morfologia. Brasil.

Hélio Conte [Orientador] - UEM Maria Eliza Miyoko Tomotake - UNICENTRO Ana Silvia Lapenta - UEM Maria Claudia Colla Ruvolo Takasusuki - UEM Satiko Nanya - UEM

Resumo: A principal praga que parasita a cana-de-açúcar é a Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Cambridae) que em seu estádio larval penetra no colmo da cana, a injúria causada pela praga está relacionada com a abertura de galerias no colmo da planta que possibilita a entrada de fungos, quebra pela diminuição da resistência frente ao vento, enraizamento aéreo, morte das gemas apicais, entre outros. Também no processo de industrialização ocorrem prejuízos consideráveis como produção de açúcar invertido e problemas na fermentação. O ataque da broca da cana-de-açúcar em 1% dos colmos pode diminuir a produção de açúcar em 35 kg. e em 30 litros de álcool por hectare. No Brasil a área estimada nos anos de 2012/2013 é de 8,5 milhões de hectares, pela importância dessa cultura, o controle dessa praga tem sido pesquisada há muito tempo, entre elas destacamos o uso de inimigos naturais como a vespa Cotesia flavipes (CAMERON, 1891) (Hymenoptera: Braconidae), que se mostrou como um dos recursos mais eficientes no controle da broca da cana-de-açúcar. C. flavipes é uma vespa originária da Ásia, introduzida no Brasil em 1971 como endoparasita da Diatraea saccharalis. A fêmea depositas seus ovos, aproximadamente 60 , introduzindo seu aparelho ovopositor no corpo da lagarta da D. saccharalis depois da eclosão do ovo a larva da vespa se desenvolve na hemolinfa da lagarta, em aproximadamente 15 dias ocorre a empupação da C. flavipes formando massas e rompendo a epiderme da lagarta, promovendo assim sua morte. Por ser um parasita cenobionte preserva a vida do hospedeiro até completar o seu ciclo, apesar dos parasitas cenobiontes produzirem, nos hospedeiros, alterações na composição da hemolinfa, sistema endócrino e sistema imunológico a manutenção dos órgãos é de suma importância para o ciclo de vida do parasitóide. O objeto de estudo desse trabalho são os túbulos de Malpighi (TM), principais órgãos de excreção dos insetos, e a ação do parasitismo de C. flavipes sobre essa estrutura. Em larvas de D. saccharalis os TM estão aderidos ao longo do tubo digestivo, desde a região mediana do mesêntero até o final do intestino posterior onde formam o arranjo criptonefridial, logo abaixo do esfíncter da região pilórica pode-se perceber o exato local de inserção dos túbulos no intestino, essa inserção é caracterizada pela presença de uma estrutura saculiforme denominada ampola. Na maioria dos insetos os TM são formados por dois tipos de células, as células secretoras ou principais e células reabsortivas. Como objetivo dessa pesquisa, foram desenvolvidas duas propostas, na primeira foram realizadas análises da ultramorfologia dos TM de larvas de D. saccharalis não parasitadas e com cinco e nove dias de parasitismo por C. flavipes, através de microscopia eletrônica de varredura e microscopia eletrônica de transmissão, pode-se observar uma aumento de hemócitos e a presença de teratócitos nas nas larvas parasitadas, a presença dos hemócitos indica a resposta imune da D. saccharalis e os teratócitos são células derivadas do tecido embrionário da C. flavipes que auxiliam no desenvolvimento do parasitóide. Foram encontrados dois tipos de células formadoras dos TM, células secretoras, com citoplasma bem desenvolvido, microvilosidades apicais em contato com o lúmen, invaginações de base em forma de labirintos, vesículas eletrondensas, mitocôndrias em profusão, inclusive no interior das microvilosidades e células reabsortivas, com menor quantidade de microvilosidades e mitocôndrias, citoplasma pouco desenvolvido o que determina uma formação luminal de maior calibre. No nono dia de parasitismo observaram-se mitocôndrias vacuolizadas e corpos mielínicos. A segunda proposta constou da determinação, através de testes citoquímicos da presença de proteínas, carboidratos neutros, lipídios e sais de cálcio, além da determinação dos padrões esterásicos dos TM de larvas não parasitadas e parasitadas. As regiões analisadas dos TM responderam positivamente à presença das moléculas estudadas, não houve diferenças significativas entre larvas não parasitadas e parasitadas, as regiões das células que reagiram mais intensamente aos corantes foram as regiões basais e microvilosidades, os sais de cálcio foram encontrados em maior concentração na região do reto dos túbulos. Os padrões esterásicos mostraram diferenças entre as os TM de larvas não parasitadas e parasitadas por C.flavipes. Abstract: The main pest that parasitizes sugarcane is Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Cambridae), which in its larval stage penetrates the sugarcane cane, the insult caused by the pest is related to the opening of galleries on the high Of the plant that allows the entrance of fungi, breakage by the decrease of the resistance against the wind, aerial rooting, death of the apical buds, among others. Also in the process of industrialization there are considerable losses as the production of inverted sugar and problems in the fermentation. The attack of the sugarcane borer on 1% of the stalks can reduce the sugar production by 35 kg. And in 30 liters of alcohol per hectare. In Brazil, the area estimated for the years 2012/2013 is 8.5 million hectares, due to the importance of this crop, the control of this pest has been researched for a long time, among them the use of natural enemies such as the Cotesia flavipes CAMERON, 1891) (Hymenoptera: Braconidae), which proved to be one of the most efficient resources in the control of sugarcane borer. C. flavipes is a wasp native to Asia, introduced in Brazil in 1971 as an endoparasite of Diatraea saccharalis. The female deposited its eggs, approximately 60, introducing its ovopositor apparatus in the body of the D. saccharalis caterpillar after the hatching of the egg the larva of the wasp develops in the hemolymph of the caterpillar, in approximately 15 days occurs the crushing of C. flavipes forming masses And breaking the epidermis of the caterpillar, thus promoting his death. Because it is a cenobionte parasite, it preserves the life of the host until its cycle is completed, although the cenobionite parasites produce changes in the hemolymph, endocrine system and immune system changes in the hosts, which is of paramount importance for the life cycle of the host. Parasitoid The object of study of this work are the tubules of Malpighi (TM), the main organs of excretion of insects, and the action of C. flavipes parasitism on this structure. In D. saccharalis larvae the TMs are adhered along the digestive tract, from the median region of the mesentero to the end of the posterior intestine where they form the cryptofridial arrangement, just below Of the sphincter of the pyloric region one can perceive the exact insertion site of the tubules in the intestine, this insertion is characterized by the presence of a saculiform structure called ampulla. In most insects the TMs are formed by two types of cells, the main or secretory cells and the resorptive cells. As a result of this research, two proposals were developed. In the first one, the analyzes of the TM ultramorphology of non - parasitized D. saccharalis larvae and five and nine days of parasitism by C. flavipes were carried out by means of scanning electron microscopy and electron microscopy of Transmission, an increase of hemocytes and the presence of teratocytes in the parasitized larvae can be observed, the presence of hemocytes indicates the immune response of D. saccharalis and the teratocytes are cells derived from the embryonic tissue of C. flavipes that aid in the development of Parasitoid. Two types of TM-forming cells, secretory cells, with well-developed cytoplasm, apical microvilli in contact with the lumen, base invaginations in the form of labyrinths, electron-dense vesicles, profuse mitochondria, including microvilli and resorptive cells, With less amount of microvilli and mitochondria, undeveloped cytoplasm which determines a greater caliber of luminal formation. On the ninth day of parasitism, vacuolated mitochondria and myelinic bodies were observed. The second proposal consisted of the determination of the presence of proteins, neutral carbohydrates, lipids and calcium salts, as well as the determination of the TM patterns of unparasitized and parasitized larvae by means of cytochemical tests. The analyzed regions of the TM responded positively to the presence of the molecules studied, there were no significant differences between unparasitized and parasitized larvae, the regions of the cells that reacted most intensively to the dyes were the basal regions and microvilli, the calcium salts were found in higher concentrations In the region of the rectum of the tubules. The esterases showed differences between the TM of larvae not parasitized and parasitized by C. flavipes.

Idioma: Português Data de Publicação: 2014 Local de Publicação: Maringá, PR Orientador: Prof. Dr. Hélio Conte Instituição: Universidade Estadual de Maringá . Centro de Ciências Biológicas Nível: Tese (doutorado em Ciências Biológicas) UEM: Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas

Responsavel: edson
Categoria: Aplicação
Formato: Documento PDF
Arquivo: Tese Gislei Maria Rigoni.pdf
Tamanho: 1923 Kb (1969104 bytes)
Criado: 13-12-2017 18:01
Atualizado: 14-12-2017 15:13
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