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Ttulo [PT]: Avaliao fenotpica e genotpica de Staphylococcus aureus isolados de pacientes sob tratamento dialtico e transplantados renais : estudo de associao com marcadores genticos (HLA)
Autor(es): Luciana Borges Giarola
Palavras-chave [PT]:

Microbiologia mdica. Antgenos HLA, Tipagem bacteriana. Resistncia microbiana a medicamentos. Staphylococcus aureus. Prevalnica de carreamento nasal. Bacteriologia mdica. Brasil.
Palavras-chave [EN]:
Staphylococcus aureus. Nasal carriage. Microbial Resistance to medicines. Bacterial Typing. HLA Antigens. Brazil.
rea de concentrao: Enfermagem e Processo do Cuidado
Titulao: Mestre em Enfermagem
Banca:
Joo Bedendo [Orientador] - UEM
Kazuko Uchikawa Graziano - USP
Nelson Batista de Oliveira - UEM
Lourdes Botelho Garcia - UEM
Maria Cristina Bronharo Tognim - UEM
Resumo:
Resumo: Staphylococcus aureus um patgeno envolvido na etiologia de infeces hospitalares e comunitrias. Indivduos sadios podem albergar o S. aureus na nasofaringe e superfcie corporal, sendo que a maioria das infeces invasivas por essa bactria endgena. A gravidade da doena depende do perfil de resistncia ante os antimicrobianos usualmente utilizados na prtica clnica. Pacientes transplantados renais e em dilise so de risco para a colonizao, ou infeco, pelo S. aureus multirresistente. A infeco est diretamente relacionada com a imunidade do indivduo e o Complexo Principal de Histocompatibilidade (CPH) est envolvido em tais funes. Nos seres humanos, tais molculas so conhecidas como Antgenos Leucocitrios Humanos, ou sistema HLA, do ingls Human Leucocyte Antigens. Tem sido demonstrado que diferentes especificidades do HLA podem ser mais freqentes em indivduos com determinadas doenas, entretanto pouco se conhece sobre a correlao entre a tipagem HLA e o carreamento nasal de S.aureus. O presente estudo teve por objetivo identificar a prevalncia, o perfil fenotpico e genotpico de amostras de S. aureus isoladas dos vestbulos nasais de pacientes em tratamento dialtico e transplantados renais, bem como verificar associao entre as molculas do CPH e a condio de carreamento nasal. A populao desta pesquisa foi composta por 111 pacientes em dilise e 48 transplantados renais. As amostras foram submetidas Colorao de Gram e Teste da Coagulase em tubo. A susceptibilidade aos antimicrobianos foi avaliada pelo mtodo de disco difuso e teste de determinao da concentrao inibitria mnima (CIM). O DNA foi extrado com Ctab e a tcnica de Reao em Cadeia da polimerase (PCR) foi empregada para a tipagem gentica com o oligonucleotdeo RW3A e identificao do gene mecA das amostras resistentes oxacilina. Para tipificao HLA foi utilizado o kit LABType SSO One Lambda aliado tecnologia Luminex. Entre os 48 transplantados renais, 75% apresentaram positividade para S. aureus em seus vestbulos nasais, enquanto que entre os 111 em dilise, 49% foram carreadores. Das amostras, 10 foram resistentes oxacilina e 8 apresentaram o gene mecA, todas foram sensveis vancomicina e resistentes penicilina. As demais amostras tambm mostraram alta taxa de resistncia aos demais antimicrobianos. Houve divergncia entre os resultados de resistncia oxacilina entre o mtodo de Agar diluio (11%) e disco difuso (8,7%). Os resultados da tipagem gentica mostraram um perfil mais homogneo entre as amostras isoladas de pacientes em dilise do que entre os pacientes transplantados renais. Com relao tipagem HLA e associao com carreamento nasal de S. aureus, independente do grupo de pacientes, observou-se uma maior frequncia dos alelos HLA classe I (A*03, A*68 e B*15), como sugestivo de proteo no carreamento do S. aureus; para as molculas HLA classe II, o alelo DRB1*03 parece estar relacionado como um marcador gen tico de suscetibilidade ao carreamento da bactria.

Abstract: Staphylococcus aureus is a pathogen involved in the etiology of nosocomial and community-acquired infections. Healthy individuals can lodge S. aureus in the nasopharynx, and body surface, since the majority of invasive infections caused by this bacterium is endogenous. The disease severity depends on the resistance profile in the face of the antimicrobials usually used in the clinical practice. Kidney transplant patients and on dialysis are risk factors for colonization or infection by S. aureus multi-resistant. The infection is directly related to the individual's immunity and the Major Histocompatibility Complex (MHC) is involved in such functions. In humans, such molecules are known as Human Leukocyte Antigens, or HLA, from the English Human Leukocyte Antigens. It has been shown that different HLA specificities can be more frequent in individuals with certain diseases, however not much is known about the correlation between HLA typing and S. aureus nasal carriage. The present study had as objective to identify the prevalence, genotypic and phenotypic profile of S. aureus samples isolated from nasal vestibules of patients on dialysis and kidney transplant, as well to verify association between MHC molecules and the condition of nasal carriage. The population of this research was consisting of 111 patients on dialysis and 48 kidney transplant. The samples were subjected to Gram Reaction and Tube Coagulase Test. The antimicrobial susceptibility was evaluated by disc diffusion method and test of determination of the minimum inhibitory concentration (MIC). The DNA was extracted with CTAB and the technique of Polymerase Chain Reaction (PCR) was applied for genetic typing with oligonucleotide RW3A and identification of the mecA gene of resistant samples to oxacillin. For HLA typing was used the kit LABType SSO One Lambda allied to Luminex technology. Among the 48 kidney transplant patients, 75% presented positivity for S. aureus in their nasal vestibules, whereas among the 111 on dialysis, 49% were carriers. From the samples, 10 were resistant to oxacillin and 8 presented the mecA gene, all were sensitive to vancomycin and resistant to penicillin. The others samples also showed high resistance rate to other antimicrobials. There was disagreement between the results of resistance of oxacillin between the Agar dilution method (11%) and disc diffusion (8.7%). The results of genetic typing showed a more homogeneous profile between isolates samples from dialysis' patients than between kidney transplant patients. In relation to HLA typing and association with S. aureus nasal carriage, regardless of the patient group, it was noticed a higher frequency of HLA allele class I (A*03, A*68 and B*15) as suggestive of protection in S. aureus nasal carriage; for HLA molecules class II, the allele DRB1*03 seems to be related, as a genetic marker of susceptibility to the carriage of the bacterium.

Resumen: Staphylococcus aureus es un patgeno envuelto en la etiologa de infecciones hospitalarias y comunitarias. Individuos sanos pueden albergar el S. aureus en la nasofaringe y superficie corporal, siendo que la mayora de las infecciones invasivas por esta bacteria es endgena. La gravedad de la enfermedad depende del perfil de resistencia frente a losantimicrobianos usualmente utilizados en la prctica clnica. Pacientes transplantados renales y en dilisis son de riesgo para la colonizacin o infeccin por el S. aureus multirresistente. La infeccin est directamente relacionada con la inmunidad del individuo y el Complejo Principal de Histocompatibilidad (CPH) est envuelto en tales funciones. En los seres humanos, tales molculas son conocidas como Antgenos Leucocitarios Humano, o sistema HLA, del ingls Human Leucocyte Antigens. Ha sido demostrado que diferentes especificidades del HLA pueden ser ms frecuentes en individuos con determinadas enfermedades, sin embargo poco se conoce sobre la correlacin entre el tipaje HLA y la portacin nasal de S. aureus. El presente estudio tuvo por objetivo identificar la prevalencia, el perfil fenotpico y genotpico de muestras de S. aureus aisladas de los vestbulos nasales de pacientes en tratamiento dialtico y transplantados renales, as como verificar asociacin entre las molculas del CPH y la condicin de portacin nasal. La poblacin sujeto de esta investigacin fue compuesta por 111 pacientes en dilisis y 48 transplantados renales. Las muestras fueron sometidas a la Coloracin Gram y Test de Coagulasa en tubo. La susceptibilidad a los antimicrobianos fue evaluada por el mtodo de disco difusin y test de determinacin de la concentracin inhibitoria mnima (CIM). El DNA fue extrado con Ctab y la tcnica de Reaccin en Cadena de la Polimerasa (PCR) fue empleada para el tipaje gentico con el oligonucletido RW3A e identificacin del gen mecA de las muestras resistentes a oxacilina. Para tipificacin HLA fue utilizado el kit LABType SSO One Lambda aliado a la tecnologa Luminex. Entre los 48 transplantados renales, 75% presentaron positividad para S. aureus en sus vestbulos nasales, mientras que entre los 111 en dilisis, 49% fueron portadores. De las muestras, 10 fueron resistentes a oxacilina y 8 presentaron el gen mecA, todas fueron sensibles a vancomicina y resistentes a penicilina. Las otras muestras tambin mostraron alta tasa de resistencia a los otros antimicrobianos. Hubo divergencia entres los resultados de resistencia a la oxacilina entre el mtodo de Dilucin en Agar (11%) y disco difusin (8,7%). Los resultados del tipaje gentico mostraron un perfil ms homogneo entre las muestras aisladas de pacientes en dilisis que entre los pacientes transplantados renales. Con relacin al tipaje HLA y asociacin con portacin nasal de S. aureus, independiente del grupo de pacientes, se observ una mayor frecuencia de los alelos HLA clase I (A*03, A*68 e B*15) como sugestivo de proteccin en la portacin del S. aureus; para las molculas HLA clase II, el alelo DRB1*03 parece estar relacionado como un marcador gentico de susceptibilidad a la portacin de la bacteria.
Data da defesa: 20/12/2010
Cdigo: vtls000184756
Informaes adicionais:
Idioma: Portugus
Data de Publicao: 2010
Local de Publicao: Maring, PR
Orientador: Prof. Dr. Joo Bedendo
Instituio: Universidade Estadual de Maring. Departamento de Enfermagem
Nvel: Dissertao (mestrado em Enfermagem)/
UEM: Programa de Ps-Graduao em Enfermagem

Responsavel: beth
Categoria: Aplicao
Formato: Documento PDF
Arquivo: luciana_giarola.pdf
Tamanho: 1431 Kb (1465451 bytes)
Criado: 27-05-2011 11:32
Atualizado: 27-05-2011 11:47
Visitas: 1569
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