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Consultar: Programa de Ps-Graduao em Zootecnia

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Ttulo [PT]: Polimorfismos no gene do hormnio do crescimento associado a caractersticas de crescimento de Tilpia do Nilo
Autor(es): Maria Del Pilar Rodriguez Rodriguez
Palavras-chave [PT]:

Aquicultura. Tilpia do Nilo. Hormnio do crescimento. Gene. Polimorfismos. Fibras musculares, Brasil.
Palavras-chave [EN]:
Growth hormone. Polymorphisms. Tilpia. Brazil.
rea de concentrao: Produo Animal
Titulao: Doutor em Zootecnia
Banca:
Eliane Gasparino [Orientador] - UEM
Sandra Maria Simonelli - CESUMAR
Robie Allan Bombardelli - UNIOESTE
Nelson Maurcio Lopera Barreto - UEM
Christiano Rodrigues Schamber - UEM
Resumo:
Resumo: O gene hormnio do crescimento (GH) tem sido ponto de estudo para muitos pesquisadores, pois se tem demonstrado que ele atua em vrios processos fisiolgicos. Tcnicas moleculares como o sequenciamento, tm permitido o acesso informao da estrutura genmica do gene GH e seus polimorfismos, alguns destes relacionados com melhores desempenhos e/ou produo. As tilpias apresentam dois GH chamados de GH1 e GH2 suas sequncias se encontram no banco genmico GENBANK, com nmeros de acesso M97766.1 e M97765 respectivamente, quando feito o alinhamento destas sequncias, encontramos uma alta homologia. No entanto, observa-se a repetio de um microssatlite (CTGT) localizado a dois pares de bases do xon 2. O GH1 apresenta sete repeties e o GH2 seis repeties. Um par de primers especficos para os genes GH1 e GH2 que amplificam uma regio comum, onde a nica diferena esperada so os quatro pares de bases referentes repetio (CTGT) a menos, anteriormente descrita em GH2, e apresenta uma diferena de aproximadamente 50pb em alguns indivduos de tilpias, definindo assim, dois tipos de indivduos quando usado o par de primers: aqueles que apresentam um s fragmento de 650 pb chamados de GHbs (GH banda simples) e os que apresentam dois fragmentos 650pb e 700pb GHbd (GH banda dupla). Ante esta observao, o objetivo da pesquisa foi caracterizar polimorfismos ainda no reportados GHbs e GHbd, por meio da tcnica de sequenciamento para variedades de tilpia GIFT, Tailandesa, Bouak e alguns dos seus cruzamentos e calcular as frequncias destes polimorfismos. A partir dos resultados do sequenciamento GHbs, passou a ser chamado GH/Ho indivduos que se encontram em homozigose com o mesmo nmero de repeties (CTGT) em GH1 e GH2 e GHbd como GH/He indivduos que se encontram em heterozigose com nmero diferente de repeties (CTGT) em GH1 e GH2. Sendo assim, os outros objetivos, como avaliar a relao que existe entre os polimorfismos GH/Ho e GH/He com as caractersticas de desempenho, sendo feita avaliao do crescimento de tilpias GIFT x xvii Tailandesa num perodo de 150 dias e analisar o crescimento hipertrfico e hiperplsico do msculo branco aos 30-60-90 e 120 dias de idade das tilpias, sendo coletado msculo lateral direito que foi includo em parafina para cortes semi-seriados e colorao hematoxilina-eosina. Os resultados do seqenciamento mostraram que, quando feitos os alinhamentos das seqncia dos gentipos GHbs e GHbd, estes apresentam mutaes pontuais como transverses, transies e delees, quando comparadas com as seqncias dos genes GH1 e GH2. Tambm foi descrito que os indivduos podem estar tanto em homozigose (GH/Ho) ou heterozigose (GH/He) com relao ao nmero de repeties do microssatlite (CTGT) em GH1 e GH2. As freqncias dos gentipos na variedade Tailandesa e cruzamento GIFT x Tailandesa apresentaram 50% de GH/He e GH/Ho, GIFT da quinta gerao proveniente de um programa de melhoramento apresentou 90% de GH/Ho e cruzamentos GIFT x Bouake (GxB) verificou-se 100% de indivduos GH/He. Nos resultados para as caractersticas morfomtricas e de desempenho, foi observado efeito significativo do padro de amplificao GH/He para peso final (PF), ganho em peso (GP), comprimento total (CT), comprimento de cabea (CCAB), peso de cabea (PCAB), peso de peixe eviscerado (PPevis) e peso do fil sem pele (PFil). As avaliaes histolgicas das fibras musculares brancas dos gentipos no apresentaram diferena significativa nas freqncias para a maioria das idades consideradas. Podemos concluir que, tanto GH1 e GH2 podem apresentar 6 ou 7 repeties do microssatlite CTGT, outros polimorfismos de baixa freqncia podem ser encontrados na regio estudada do gene GH na variedade GIFT e as freqncias de GH/Ho ou GH/He podem estar associadas variedade. Nas avaliaes do desempenho, os indivduos GH/He apresentaram diferenas significativas para algumas caractersticas, no entanto, preciso um estudo que verifique se existe alterao nos aminocidos ou regies regulatrias do gene GH, j no crescimento do msculo branco no se encontram diferenas entre os polimorfismos.

Abstract: The growth hormone gene (GH) has been a point of study for many researchers because it has been shown that it acts in various physiological processes. Molecular techniques such as sequencing have enabled access to the genomic structure information of GH gene and its polymorphisms, some of these correlated with improved performance and/or production. Tilapia have two GH called GH1 and GH2 their genomic sequences are in the GENBANK database with access numbers of M97766.1 and M97765, respectively, when done the alignment of these sequences we found a high homology. However, there is the repetition of a microsatellite (CTGT) located at two base pairs of the exon 2, the GH1 has seven replications and GH2 has six replications. A pair of specific primers for the GH1 and GH2 genes that amplify a commum region, where the only expected difference are the four base pairs relating to repetition (CTGT) at least, previously described in GH2, shows a difference of approximately 50bp tilapia in some individuals of tilapia, thus defining two types of individuals when using the primer pair, those with a single fragment of 650bp called GHbs (GH single band) and those with two fragments 650pb and 700pb GHbd (GH band double). Given this observation the research objective was to characterize polymorphisms not yet reported GHbs and GHbd by sequencing technique for varieties of GIFT tilapia, Thai, Bouak and some of its crossings and calculate the frequencies of these polymorphisms . From the results of sequencing GHbs came to be called GH/Ho individuals who are homozygous with the same number of repetitions (CTGT) in GH1 and GH2 and GHbd as GH/He individuals who are heterozygous with different number of repetitions (CTGT) in GH1 and GH2. Thus, the other objectives were to evaluate the relationship between the polymorphisms GH/HO and GH/He with the performance characteristics polymorphisms, assessing the growth of tilapia GIFT x Thai in a period of 150 days and analyze the hyperplastic and hypertrophic growth of white muscle at 30-60-90 and 120 days of age tilapia, being collected right lateral muscle which was insert paraffin for semi-serial cuts and hematoxylin-eosin staining. The results of sequencing revealed that, when made the sequences aliggnments of genotypes GHbs and GHbd these have mutations as transversions, transitions and deletions when compared to the sequences of the GH1 and GH2 genes. It was also described that individuals can be either homozygous (GH/Ho) or heterozygous (GH/He) with respect to the number of the microsatellite repeats (CTGT) in GH1 and GH2. The genotype frequencies in Thai variety and crossing Thai Thai x GIFT showed 50% of GH/HE and GH/Ho, GIFT of fifth generation from a breeding program showed 90% of GH/Ho and crossing GIFT x Bouake (GXB) found up 100% of individuals GH/He. The results of the morphometric and performance was a significant effect of amplification pattern GH/He for final weight (FW), weight gain (WG), total length (TL), head length (CCAB), head weight was observed (PCAB), weight of gutted fish (PPevis) and weight of skinless fillet (pFILE). Histological evaluations of white muscle fibers of the genotypes showed no significant difference in the frequencies for most ages considered. We can conclude that both GH1 and GH2 may have 6 or 7 repeats of microsatellite CTGT, other low-frequency polymorphisms can be found in the studied region of the GH gene in variety GIFT and frequencies of GH/HO or GH/He may be associated with variety. Evaluations of performance the GH/He individuals showed significant differences for some features, however, it takes a study to examine whether there is change in the amino acid or regulatory regions of the GH gene, yet in the growth of white muscle there are no differences between the polymorphisms.
Data da defesa: 4/04/2014
Cdigo: vtls000215522
Informaes adicionais:
Idioma: Portugus
Data de Publicao: 2014
Local de Publicao: Maring, PR
Orientador: Prof. Dr. Eliane Gasparino
Co-Orientador: Prof. Dr. Ricardo Pereira Ribeiro
Instituio: Universidade Estadual de Maring. Centro de Cincias Agrrias. Programa de Ps-Graduao em Zootecnia
Nvel: Tese (doutorado em Zootecnia)
UEM: Departamento de Zootecnia

Responsavel: edson
Categoria: Aplicao
Formato: Documento PDF
Arquivo: Tese Doutorado Maria Del Pilar Rodriguez.pdf
Tamanho: 1239 Kb (1268257 bytes)
Criado: 12-05-2016 18:56
Atualizado: 12-05-2016 19:05
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