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Consultar: Programa de Ps-Graduao em Gentica e Melhoramento

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Ttulo [PT]: Anlise da expresso da protena de reparo Kin 17 em clulas em cultura Bm5 e em tecidos larvais de Bombyx mori L
Ttulo [EN]: Kin17 repair protein expression analysis on Bm5 culture cells and larval tissues of the Bombyx mori L.
Autor(es): Fabiana dos Santos Rando
Palavras-chave [PT]:

Bombyx mori (lagartas hbridas). Clulas Bm5. Tecidos larvais. Bicho-da-seda (lagartas hbridas). Protena kin17. Protena de reparo. Brasil.
Palavras-chave [EN]:
Bombyx mori. Bm5 culture cells. kin17. Brazil.
rea de concentrao: Gentica e Melhoramento
Titulao: Mestre em Gentica e Melhoramento
Banca:
Maria Aparecida Fernandez [Orientador] - UEM
Flvio Augusto Vicente Seixas - UEM
Jos Luis da Conceio Silva - UEM
Resumo:
Resumo: Bombyx mori (Linnaeus, 1758), popularmente conhecido como bicho-da-seda, um inseto de importncia econmica para a produo de seda e tambm o segundo inseto mais utilizado como organismo modelo para estudos biolgicos. O estresse pela infeco, causados por vrus e bactrias, um dos fatores chaves para a queda da produo. A protena de reparo kin17 uma importante protena associada ao estresse celular, replicao do DNA e processamento de RNAs. O objetivo deste trabalho foi analisar a expresso da protena kin17 em tecidos larvais do 5 instar de B. mori, incluindo glndulas sericgenas, corpo gorduroso, ovrio, testculo, tbulo de Malpighi e sistema nervoso. Tambm foram analisados extratos proteicos de clulas em cultura de B. mori, linhagem de Bm5, em diferentes perodos (0, 12, 24 e 48 horas), aps a infeco pelo baculovirus BmNPV. As amostras foram extradas de cada tecido e extrato celular e analisadas por meio da tcnica de western blotting, utilizando anticorpos policlonais monoespecficos contra a kin17 de humanos. Os resultados mostraram a deteco de uma banda de aproximadamente 47kDa em todos os tecidos, exceto em glndulas sericgenas. Esta banda aparece com forte expresso nas amostras de corpo gorduroso e testculo. Surpreendentemente, observado tambm uma banda de aproximadamente 40kDa, mais expressa em tbulo de Malpighi, sistema nervoso e corpo gorduroso. Nas amostras extradas de cultura de clulas controle e infectadas, tambm foram detectadas duas fraes proticas, com os mesmos pesos moleculares encontrados em tecido. Assim, foi possvel a deteco da kin17 nos tecidos e no extrato proteico de B. mori e ambosapresentam duas isoformas. Este trabalho mostra pela primeira vez as duasisoformas da protena de reparo kin17 em clulas Bm5 e tecidos larvais de B. mori. A deteco de duas isoformas da kin17 em B. mori oferece uma nova perspectiva na compreenso do papel celular desempenhado por essa protena.

Abstract: Bombyx mori (Linnaeus, 1758) popularly known as silkworm silk, is an insect of great economic importance in the silk production and it is also the second organism used as a model organism for molecular studies. Environmental stress that causes viral or bacterial infection is one of the key factors in production decay. The repair kin17 protein is a major protein associated with cellular stress, DNA replication and RNA processing. In this study, our aim was to detect kin17 at 5th instar larval tissues from B. mori, including silk gland, fat body, ovaries, testicles, Malpighian tubules and nervous system. Protein extracts were also analyzed for cell culture of B. mori, lineage of Bm5, infected at different periods (0, 12, 24 and 48 hours) with the baculovirus BmNPV. Samples were extracted for each tissue and then analyzed through western blotting protocol using monoclonal antibodies against human kin17.The results showed an expected ~47kDa band on all tissues, except for the silk gland samples. The band was remarkably strong for the fat body and testicle samples. Surprisingly, an additional ~40kDa band was detected, being more expressive in the Malpighian tubules, nervous system and fat body. In samples extracted from infected and control cell culture showed, also, two fractions with the same molecular weight observed in larval tissues. Perhaps, the lower mass protein might represent an unknown isoform of kin17 in B. mori. In conclusion, the detection of the two kin17 isoforms offers new perspectives in the understanding of the cellular role of this protein.
Data da defesa: 21/02/2013
Cdigo: vtls000224460
Informaes adicionais:
Idioma: Portugus
Data de Publicao: 2013
Local de Publicao: Maring, PR
Orientador: Prof. Dr. Maria Aparecida Fernandez
Instituio: Universidade Estadual de Maring. Programa de Ps-Graduao em Gentica e Melhoramento
Nvel: Dissertao (mestrado em Gentica e Melhoramento)

Responsavel: edson
Categoria: Aplicao
Formato: Documento PDF
Arquivo: m-fsrando.pdf
Tamanho: 4418 Kb (4523944 bytes)
Criado: 12-12-2016 19:19
Atualizado: 12-12-2016 19:27
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