Resumo: Curdlana é um polissacarídeo linear, neutro, composto por repetidas unidades de glicose unidas por ligações β-(1,3), sendo considerada uma fibra alimentar. Possui especial interesse devido as suas propriedades de formação de gel, as quais permitem seu uso como agente gelificante para melhorar a textura, capacidade de retenção de água e estabilidade térmica de vários produtos alimentícios. Quando aquecida, sua suspensão aquosa forma dois tipos de gel: o gel low-set, o qual é termorreversível e obtido pelo aquecimento em temperaturas entre 55 e 60 °C, seguido de resfriamento, e o gel high-set, que é termo-irreversível e obtido pelo aquecimento acima de 80 °C. Devido a sua elevada firmeza e estabilidade, os géis de curdlana são utilizados na elaboração de massas, molhos, alimentos congelados e enlatados, além de serem biodegradáveis, comestíveis e não tóxicos para humanos e para o ambiente. Apesar de a curdlana ser um polissacarídeo linear, sua estrutura conformacional exerce grande influência nas suas propriedades de dispersão e gelificação. Uma vez que a forma de recuperação do meio e a purificação do polissacarídeo podem influenciar na sua estrutura conformacional, o estudo estrutural da curdlana, bem como das suas propriedades físico-químicas e tecnológicas, são essenciais para melhor adequar seu emprego na indústria de alimentos. Considerando o interesse na curdlana devido às suas propriedades de dispersão, viscosidade e gelificação, o presente trabalho objetivou avaliar a estrutura, morfologia e propriedades físico-químicas e tecnológicas da curdlana produzida por Agrobacterium sp. IFO 13140, comparativamente com a curdlana comercial. Também foi objetivo desta pesquisa a aplicação da curdlana em alimentos, como massa alimentícia caseira e iogurte. A cepa de Agrobacterium sp. IFO 13140 adquirida na forma liofilizada foi reativada e adicionada ao meio de produção de curdlana utilizando glicose como fonte de carbono. Duas metodologias foram utilizadas para a recuperação do polissacarídeo: a de pré-gelificação e a de precipitação. Em ambas as metodologias a curdlana foi solubilizada com solução de NaOH 3 mol/L. Posteriormente foi neutralizada com HCl 3 mol/L (pré-gelificação) ou com água (precipitação). A curdlana comercial também foi submetida ao processo de pré-gelificação e, então, denominada comercial pré-gelificada. As metodologias empregadas para recuperação da curdlana foram relacionadas com suas propriedades funcionais. As curdlanas comercial, comercial pré-gelificada e produzidas por Agrobacterium sp. IFO 13140 (recuperadas pelos dois métodos) foram avaliadas quanto a sua estrutura, morfologia, propriedades físico-químicas e capacidade de dispersão e gelificação. Após esta etapa, as duas curdlanas submetidas ao processo de pré-gelificação foram utilizadas para o preparo de dispersões e géis. Foram estudados os mecanismos de formação de géis de curdlana por espectroscopias de FT-IR e FT-Raman, bem como suas temperaturas de formação por análises térmicas de DSC e TGA. As curdlanas submetidas ao processo de pre-gelificação, assim como a curdlana comercial, foram avaliadas quanto as suas propriedades tecnológicas de absorção de água, óleo e solubilidade em água. Posteriormente, foram aplicadas em massa alimentícia caseira e iogurte nas proporções de 1% e 1,5%, em relação às quantidades de farinha e leite, respectivamente. As características de cozimento e o perfil de textura das massas foram avaliados. Dos iogurtes, foram avaliadas reologia, textura e sinérese. A análise de FT-Raman das curdlanas comercial, comercial pré-gelificada e produzida por Agrobacterium sp. IFO 13140 (recuperada pelos métodos de pré-gelificação e precipitação) revelou similaridade estrutural entre todas as amostras, o que significa que a curdlana produzida pelo micro-organismo tem estrutura similar à comercial e, também, que o método empregado para recuperação do polissacarídeo não influencia na sua estrutura. Entretanto, dados da microscopia eletrônica de varredura revelaram que tanto o método de secagem quanto o método de recuperação implicam significativamente na forma e no tamanho dos grânulos da curdlana. A amostra comercial (atomizada) apresentou grânulos grandes e com concavidades. As demais amostras (liofilizadas) exibiram partículas menores. Ainda, as duas curdlanas submetidas ao processo de pré-gelificação apresentaram o menor tamanho de partícula, o que pode ter influenciado na sua melhor dispersão em água. Os resultados obtidos nas análises físico-químicas revelaram que a curdlana comercial apresentou o maior teor de carboidratos, seguida da produzida pelo micro-organismo e recuperada por precipitação, demonstrando o maior grau de pureza dessas amostras. As curdlanas submetidas ao processo de pré-gelificação apresentaram menor teor de carboidratos devido ao sal incorporado no processo (estimado pelo teor de sódio). Quando avaliadas as características de dispersão e gelificação das curdlanas, as amostras pré-gelificadas formaram facilmente uma dispersão homogênea em água, além de desenvolverem gel firme e homogêneo. A curdlana comercial não formou dispersão homogênea com facilidade e nem gel homogêneo, assim como a curdlana produzida por Agrobacterium sp. IFO 13140 recuperada por precipitação, que não formou gel pela ausência de sódio. Desta forma, as análises térmicas, reológicas e de força de gel foram realizadas apenas com as curdlanas pré-gelificadas. A curdlana comercial foi comparada com as pré-gelificadas em relação às propriedades tecnológicas de absorção de água, de óleo e solubilidade em água, além da aplicação em alimentos. As análises de FT-IR e FT-Raman revelaram similaridade estrutural entre a curdlana comercial e a produzida por Agrobacterium sp. IFO 13140. Não foi possível identificar variações estruturais decorrentes da formação de gel pela técnica de FT-IR. Entretanto, a técnica de FT-Raman evidenciou essas variações, sendo possível observar variações relacionadas às ligações de hidrogênio e interações hidrofóbicas, que ocorrem com a formação dos géis low-set e high-set, respectivamente. As temperaturas de formação de ambos os géis foram determinadas por DSC. As amostras apresentaram um pico endotérmico entre 40 e 55 °C, decorrente do entumescimento da curdlana, e um pico entre 70 e 80 °C devido a interações hidrofóbicas entre as moléculas. Ainda, as análises de reologia e força do gel revelaram que a curdlana produzida por Agrobacterium sp. IFO 13140 mostrou capacidade espessante superior à curdlana comercial pré-gelificada. Porém, a última mostrou capacidade gelificante mais elevada, com gel de força 17% superior e módulo elástico seis vezes maior, a 95 °C. Esta grande diferença entre as capacidades gelificantes das curdlanas é devido aos seus distintos graus de polimerização (DPn) ou massa molecular, pois enquanto a amostra comercial apresentou DPn de 334 ± 8, a amostra produzida pelo micro-organismo apresentou DPn de 232 ± 10, os quais correspondem a massas moleculares de 54000 e 38000, respectivamente...
Abstract: Curdlan is a linear, neutral polysaccharide composed of repeated β-(1,3)-linked glucose residues, and is considered a food fiber. It is of special interest due to its gel formation properties, which allow it to be used as a gelling agent to improve the texture, water retention capacity and thermal stability of various food products. When heated, its aqueous suspension forms two types of gel: low-set gel, which is thermo-reversible and obtained by heating at temperatures between 55 and 60 °C, followed by cooling, and high-set gel, which is thermo-irreversible and obtained by heating at over 80 °C. Because of their high firmness and stability, curdlan gels are used in the manufacture of pasta, sauces, frozen and canned foods, and are biodegradable, edible and non-toxic to humans and the environment. Although curdlan is a linear polysaccharide, its conformational structure has a great influence on its dispersion and gelling properties. As the recovery of the medium and the purification of the polysaccharide can influence its conformational structure, the structural study of curdlan, as well as its physicochemical and technological properties, is essential for its more effective use in the food industry. Considering the interest in curdlan due to its dispersion, viscosity and gelling properties, the present study aimed to evaluate the structure, morphology and physical-chemical and technological properties of curdlan produced by Agrobacterium sp. IFO 13140, compared to commercial curdlan. A further objective of this study was the application of curdlan in foods, such as homemade pasta and yogurt. The strain of Agrobacterium sp. IFO 13140 acquired in lyophilized form was reactivated and added to the curdlan production medium using glucose as a carbon source. Two methodologies were used to recover the polysaccharide: pre-gelation and precipitation. In both methodologies the curdlan was solubilized with NaOH 3 mol/L solution. Subsequently it was neutralized with HCl 3 mol/L (pre-gelation) or with water (precipitation). The commercial curdlan was also subjected to the pre-gelation process and entitled pre-gelled commercial curdlan. The methodologies used to recover the curdlan were related to their functional properties. The commercial and pre-gelled commercial curdlans and the curdlan produced by Agrobacterium sp. IFO 13140 (recovered by both methods) were evaluated for their structure, morphology, physicochemical properties and dispersion and gelation capacity. After this step, the two curdlans submitted to the pre-gelation process were used for the preparation of the dispersions and gels. The mechanisms of formation of the curdlan gels were examined by FT-IR and FT-Raman spectroscopy, and their formation temperatures were evaluated by DSC and TGA analyzes. The curdlans submitted to the pre-gelation process, as well as the commercial curdlan, were evaluated for their technological properties of water absorption and oil and water solubility. Subsequently, they were applied in homemade pasta and yogurt in proportions of 1% and 1.5%, in relation to the quantities of flour and milk, respectively. The cooking characteristics and the texture profile of the pasta were evaluated. Rheology, texture and syneresis were evaluated from the yoghurt. FT-Raman analysis of the commercial and pre-gelled commercial curdlans and the curdlan produced by Agrobacterium sp. IFO 13140 (recovered by the pre-gelation and precipitation methods) revealed a structural similarity between all the samples, meaning that the curdlan produced by the microorganism has a similar structure to the commercial curdlan, and that the method used for the recovery of the polysaccharide does not influence its structure. However, scanning electron microscopy data revealed that both the drying method and the recovery method significantly affected the shape and size of the curdlan granules. The commercial (atomized) sample had large granules with concavities. The other samples (lyophilized) exhibited smaller particles. Also, the two curdlans submitted to the pre-gelation process had the smallest particle size, which may have influenced their improved dispersion in water. The results obtained in the physical-chemical analyzes revealed that the commercial curdlan had the highest carbohydrate content, followed by that produced by the microorganism and recovered by precipitation, demonstrating the greater purity of these samples. The curdlans submitted to the pre-gelation process presented a lower carbohydrate content, due to the salt incorporated in this process (calculated by the sodium content). When the characteristics of the dispersion and gelation of the curdlans were evaluated, the pre-gelled samples dispersed easily and homogenously in water, and developed a firm and homogenous gel. The commercial curdlan did not easily form a homogeneous dispersion or gel. The same was true for the curdlan produced by Agrobacterium sp. IFO 13140 recovered by precipitation, which did not gel due to the absence of sodium. Therefore, the thermal, rheological and gel strength analyzes were performed using the pre-gelled curdlans only. The commercial curdlan was compared with the pre-gelled curdlans in terms of the technological properties of absorption of water and oil and solubility in water, as well as application in foods. The FT-IR and FT-Raman analyses revealed a structural similarity between the commercial curdlan and the curdlan produced by Agrobacterium sp. IFO 13140. It was not possible to identify the structural variations resulting from the gel formation using the FT-IR technique. However, the FT-Raman technique did identify these variations, allowing variations related to the hydrogen bonding and hydrophobic interactions to be observed. The formation temperatures of both gels were determined by DSC. The samples revealed an endothermic peak between 40 and 55 °C, due to the swelling of the curdlan, and another peak between 70 and 80 °C due to hydrophobic interactions between the molecules. Additionally, rheology and gel strength analysis revealed that the curdlan produced by Agrobacterium sp. IFO 13140 had a greater thickening capacity than the pre-gelled commercial curdlan. However, the latter exhibited a greater gelling capacity, resulting in a gel with a 17% greater strength and a six times greater elastic modulus at 95 °C. This difference between the gelling properties of the curdlans is due to their different degrees of polymerization (DPn) or molecular mass, as while the commercial sample had a DPn of 334 ± 8, the sample produced by the microorganism had a DPn of 232 ± 10, corresponding to molecular masses of 54000 and 38000, respectively. When the water and oil absorption and water solubility properties of the commercial curdlan and the curdlans from the pre-gelation process were evaluated, the low water solubility and absorption of all the samples were confirmed. However, the curdlans submitted to the pre-gelation process presented high oil absorption values that were greater than those of water absorption, making these ingredients useful in the structural interactions of various foods. The use of curdlans submitted to the pre-gelation process in pasta and yoghurt improved the texture characteristics of these products. In the pasta, pre-gelled curdlans increased the cooked weight (about 10%) and significantly increased hardness, adhesiveness and gumminess. The commercial curdlan did not result in a significant improvement in any of the parameters of mass as, due to its difficulty with homogenization, it did not gel homogeneously after cooking. Similarly, when applied to the yogurt and subjected to heat treatment, the pre-gelled curdlans significantly increased the firmness and adhesiveness parameters and decreased the cohesiveness of the products, due to the structuring caused by the formation of the curdlan gel... |