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Ttulo [PT]: Expresso gnica, produo de ros e atividade enzimtica em funo de suplementao de metionina e estresse trmico em aves
Autor(es): Ana Paula Del Vesco
Palavras-chave [PT]:

Frango de corte. Metionina. Genes mitocondriais. RNA. Codorna. Estresse oxidativo. Estresse trmico. Brasil.
Palavras-chave [EN]:
Broiler. Methionine. Mitochondrial genes. RNA. Quail. Oxidative stress. Heat stress. Brazil.
rea de concentrao: Produo Animal
Titulao: Mestre em Zootecnia
Banca:
Eliane Gasparino [Orientador] - UEM
Simone Eliza Facioni Guimares - UFV
Maria Claudia Colla Ruvolo Takasusuki - UEM
Resumo:
Resumo: A taxa de crescimento das aves est atrelada eficincia alimentar e a deposio de massa muscular bem como, s condies ambientais a que os animais so expostos. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar o ganho de peso e converso alimentar das aves, a expresso de genes mitocondriais participantes da sntese de energia, mRNA UCP (protena desacopladora), mRNA ANT (transportador de nucleotdeos de adenina) e mRNA COXIII (citocromo c oxidase subunidade III), e a expresso de genes envolvidos no crescimento animal, mRNA GHR (receptor do hormnio do crescimento) e do IGF-I (fator de crescimento semelhante a insulina I) no fgado e msculo do peito de frangos de corte, alimentados com dietas contendo duas fontes e dois nveis de suplementao de metionina, e avaliar a influncia do estresse trmico agudo sobre a produo de ROS mitocondrial e atividade da enzima glutationa peroxidase no fgado de codornas de corte. Foram utilizados frangos de corte de 22 a 42 dias de idade distribudos em cinco tratamentos (dieta basal, primeiro nvel de suplementao de DLmetionina, segundo nvel de DL-metionina, primeiro nvel de MHA-FA e segundo nvel de MHA-FA). Ao final do perodo experimental, as aves foram abatidas por deslocamento cervical, o msculo do peito e fgado foram coletados para extrao do RNA total. O cDNA foi amplificado usando primers especficos para os genes analisados pela qRT-PCR. Foram mais eficientes na converso alimentar as aves que receberam suplementao do segundo nvel de suplementao de metionina, independente da fonte comercial utilizada. J, o melhor ganho de peso foi observado no segundo nvel de suplementao de DL-metionina. Foi observado significativamente menor quantidade de mRNA UCP no msculo dos animais que consumiram dieta com adio de metionina, sendo a maior expresso deste gene observada para dieta basal, tratamento que tambm foi responsvel pela pior eficincia alimentar. A expresso de mRNA UCP no fgado, e de mRNA COX III e mRNA ANT no fgado e no msculo no sofreram ao da suplementao de metionina. A expresso dos genes GHR e IGF-I no msculo no sofreu influncia da suplementao de metionina. Entretanto, no fgado, foi observada diferena significativa entre os tratamentos basal e segundo nvel de DLmetionina sobre a expresso de mRNA GHR. Os animais que receberam esse nvel de suplementao apresentaram maior expresso do gene. A expresso de IGF-I no fgado foi maior para animais que receberam suplementao de metionina, comparados dieta basal. A suplementao do segundo nvel de DL-metionina tambm levou maior expresso em relao queles animais alimentados com o primeiro nvel de suplementao de DL-metionina (1,56 UA vs 0,97 UA). A suplementao de metionina melhorou o ganho de peso e a eficincia alimentar, como era esperado, em parte, por influenciar a expresso de genes envolvidos nestas caractersticas. Para avaliao da produo de ROS e da atividade da enzima glutationa peroxidase, aos 30 dias de idade, codornas de corte foram divididos em dois grupos: os animais pertencentes ao tratamento termoneutro foram abatidos imediatamente e o segundo grupo foi submetido ao estresse trmico de 34oC por 24 horas. Para anlise de produo de ROS, foram coletados os fgados para isolamento de mitocndrias e subsequente anlise de ROS mitocondrial. Atividade da enzima glutationa peroxidase foi determinada utilizando perxido de hidrognio (H2O2), e baseada na quantidade de NADPH oxidado. Foi observada maior produo de ROS mitocondrial para animais submetidos ao estresse trmico, 0,34 vs 0,22, para reaes contendo apenas rotenona, e 0,31 vs 0,23, nas reaes com a presena de rotenona mais antimicina. Codornas que permaneceram em ambiente de estresse trmico apresentaram tambm significativamente maior atividade da enzima glutationa peroxidase nos hepatcitos (47,8 vs 39,6). Assim, verificou-se que estresse trmico agudo, de 34oC por 24 horas, foi capaz de atuar na produo de ROS mitocondrial e na atividade da enzima glutationa peroxidase no fgado de codornas.

Abstract: The growth rate of birds occurs due to the feed efficiency and deposition of muscle mass, as well as environmental conditions. Thus, this study aimed to evaluate the weight gain and feed conversion and the expression of mitochondrial genes involved in the energy synthesis, mRNA UCP (uncoupling protein), mRNA ANT (adenine nucleotide translocator) and mRNA COXIII (cytochrome c oxidase subunit III), and the expression of genes involved in animal growth, GHR mRNA (growth hormone receptor) and IGF-I (insulin-like growth factor I) in the liver and in the breast muscle of broilers fed with diets containing two sources and two levels of methionine supplementation, and to evaluate the influence of acute thermal stress on the production of mitochondrial ROS and glutathione peroxidase activity in the liver of quails. In this work broilers from 22 to 42 days of age were distributed into five treatments (basal diet, supplementations of first level of DL-methionine, of second level of DL-methionine, of first level of MHA-FA and second level of MHA-FA). At the end of the experimental period the birds were killed by cervical dislocation, the breast muscle and the liver were collected for total RNA extraction. The cDNA was amplified using specific primers designed for the genes analyzed by qRT-PCR. The birds fed with second level of methionine supplementation were more efficient in the feed conversion, regardless the commercial source used. The best weight gain was observed in the second level of DLmethionine supplementation. Significant lower amount of mRNA UCP was observed in the breast muscle of animals fed with diets containing added methionine, being the highest expression of this gene observed in broilers fed with the basal diet, treatment which was also responsible for the worst feed efficiency. The mRNA UCP expression in the liver, and the mRNA COX III and mRNA ANT expression in the liver and in the muscle was not influenced by methionine supplementation. The GHR and IGF-I gene expression in the breast muscle was not affected by methionine supplementation. However, a significant difference between the basal diet and the second level of DLmethionine on GHR mRNA expression in the liver was observed, whereas animals which received this level of supplementation showed higher expression of the gene. The expression of IGF-I in the liver was higher in the animals fed with diets supplemented with methionine compared to those fed with basal diet. The second level of DLmethionine supplementation also had the highest expression in relation to those animals which received the first level of DL-methionine supplementation (1.56 AU vs 0.97 AU).The methionine supplementation improved weight gain and feed efficiency, as expected, in part, by influencing the expression of genes involved in these characteristics. The birds? performance is also affected by environmental conditions. Thus, an experiment was conducted with the purpose of evaluating the production of mitochondrial ROS and glutathione peroxidase activity. Quails with 30 days of age were divided into two groups, the animals pertaining to thermoneutral treatment were slaughtered immediately and the second group was subjected to thermal stress of 34oC for 24 hours. To analyze the production of ROS, the livers were collected for the isolation of mitochondria and subsequent analysis of mitochondrial ROS. Glutathione peroxidase activity was determined using hydrogen peroxide (H2O2), and based on the amount of NADPH oxidized. A higher production of mitochondrial ROS was observed in animals subjected to thermal stress, 0.34 vs 0.22, for reactions containing only rotenone, and 0.31 vs 0.23, in reactions containing rotenone and antimycin. Quails that remained in the environment of heat stress also had significantly higher glutathione peroxidase activity in the hepatocytes (47.8 vs. 39.6). Therefore, it was observed that acute thermal stress of 34oC for a period of 24 hours was able to act in the mitochondrial ROS production and in the glutathione peroxidase activity in the liver of quails.
Data da defesa: 02/03/2012
Cdigo: vtls000198747
Informaes adicionais:
Idioma: Portugus
Data de Publicao: 2012
Local de Publicao: Maring, PR
Orientador: Prof. Dr. Eliane Gasparino
Instituio: Universidade Estadual de Maring. Centro de Cincias Agrrias
Nvel: Dissertao (mestrado em Zootecnia)/
UEM: Programa de Ps-Graduao em Zootecnia

Responsavel: zenaide
Categoria: Aplicao
Formato: Documento PDF
Arquivo: Ana P. Del Vesco.pdf
Tamanho: 724 Kb (741599 bytes)
Criado: 14-10-2015 08:02
Atualizado: 14-10-2015 08:21
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