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Consultar: Programa de Ps-Graduao em Cincias Biolgicas (Biologia Celular)

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Ttulo [PT]: Aplicaes biotecnolgicas do fungo ligninoltico pleurotus pulmonarius (FR.) qul
Autor(es): Bruna Polacchine da Silva
Palavras-chave [PT]:

Pleurotus pulmonarius. Enzimas ligninolticas. Mangans peroxidase. Pleurotus pulmonarius.
Antimicrobiano. Antifngico. Antibacteriano. Pleurotus pulmonarius. Medicinal mushroom (Fungo medicinal). Pleurotus pulmonarius (Basidiomicetos). Fungos da podrido branca. Brasil.
Palavras-chave [EN]:
Pleurotus pulmonarius. White-rot fungi. Manganese peroxidase. Antimicrobial activity. Antifungal activity. Brazil.
Titulao: Doutor em Cincias Biolgicas
Banca:
Rosane Marina Peralta [Orientador] - UEM
Aneli de Melo Barbosa Dekker - UEL
Gisella Maria Zanin - UEM
Bencio Alves de Abreu Filho - UEM
Cristina Giatti Marques de Souza - UEM
Resumo:
Resumo: Basidiomicetos e Ascomicetos desempenham importante papis no equilbrio ambiental. Eles so os maiores decompositores do material lignocelulsico em vrios ecossistemas e tm grande importncia no ciclo do carbono e outros nutrientes. Existem mais de 10.000 espcies de fungos da podrido branca de madeira, com variadas capacidades em degradar a lignina, celulose e hemicelulose. Entretanto somente algumas dezenas so mais propriamente estudados. Os fungos da podrido branca mais estudados pertencem a seis famlias: Phanerochaetaceae (Phanerochaete chrysosporium), Poliporaceae (Trametes versicolor e Pycnoporus sanguineus), Marasmiaceae (Lentinula edodes), Pleurotaceae (cogumelos ostra tais como Pleurotus ostreatus e Pleurotus pulmonarius), Hymenochaetaceae (Inonotus hispidus e Phellinus igniarius), Ganodermataceae (Ganoderma lucidum e Ganoderma applanatum) e Meruliaceae (Bjerkandera adusta, Irpex iacteus e Phlebia radiate). O objetivo do primeiro artigo foi a purificao e a caracterizao da enzima peroxidase dependente de mangans (MnP) de Pleurotus pulmonarius bem como a avaliao da sua capacidade em descolorir corantes sintticos. P. pulmonarius foi cultivado por 14 dias sob condies em estado slido utilizando resduos de abacaxi como substrato. Nestas condies, MnP foi a principal enzima ligninoltica produzida pelo fungo. A enzima foi purificada at aparente homogeneidade eletrofortica atravs de precipitao com acetona e gel filtrao utilizando coluna de Sephadex G-100. Os principais resultados foram: a MnP foi purificada 12,1 vezes, com um rendimento de 28,4% e uma atividade especfica de 135,52 U/mg protena. A protena monomrica de 42KDa apresentou maior atividade em pH de 4,0 a 6,0 e temperatura de 50C. A enzima foi estvel a temperatura de at 40C. A -20C a enzima foi estvel por pelo menos 6 meses. Os valores de KM para Mn+2 e H2O2 a pH 4,5 e 40C foram A enzima foi totalmente dependente de Mn+2 para oxidar compostos fenlicos e no fenlicos. A enzima mostrou alta atividade e estabilidade na presena de solventes orgnicos tais como acetona, etanol, isopropanol e acetonitrila e foi capaz de descolorir o corante antraquinonico Remazol Brilliant Blue R e o corante azo Vermelho do Congo na presena de 1M Na2SO4 e NaCl. As propriedades apresentadas pela MnP de P. pulmonarius tornam esta enzima um bom agente para o tratamento de efluentes txteis. Os objetivos do segundo trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana de extratos miceliais de Pleurotus pulmonarius obtidos em cultivos submersos utilizando glicose, amido e bagao de mandioca como substratos. As maiores atividades antimicrobianas foram obtidas nos extratos miceliais de 6 dias de cultivo utilizando glicose e amido como substrato. Apesar dos esforos, no foi possvel identificar quais molculas so responsveis pela atividade antimicrobiana nos extratos miceliais de P. pulmonarius.

Abstract: Basidiomycetes and Ascomycetes play a crucial role in the balance of ecosystems. They are the major decomposers of lignocellulosic material in several ecosystems and play an essential role in the cycling of carbon and other nutrients. There are about 10,000 species of white rot fungi, with varying capacities to degrade lignin, cellulose and hemicellulose. However, only a few dozen have been properly studied. Most commonly studied species of white rot fungi are subdivided into six families: Phanerochaetaceae (Phanerochaete chrysosporium), Poliporaceae (Trametes versicolor and Pycnoporus sanguineus), Marasmiaceae (Lentinula edodes), Pleurotaceae (oyster mushrooms such as Pleurotus ostreatus and Pleurotus pulmonarius) Hymenochaetaceae (Inonotus hispidus and Phellinus igniarius) Ganodermataceae (Ganoderma lucidum and Ganoderma applanatum) and Meruliaceae (Bjerkandera adusta, Irpex iacteus and Phlebia radiate). The objective of the first article was to purify and characterize the enzyme manganese peroxidase (MnP) of Pleurotus pulmonarius and evaluate its capability to decolorize synthetic dyes. P. pulmonarius was cultured for 14 days under solid state conditions using pineapple wastes as substrate. Under this condition, MnP was the main ligninolytic enzyme found in the culture filtrates. The enzyme was purified to apparent electrophoretic homogeneity through acetone precipitation and gel filtration using Sephadex G-100 column. The main results were: MnP was purified 12.1-folds with a yield of 28.4% and a specific activity of 135.52 U/mg proteins. The 42 KDa-monomeric proteins were active over a large range of pH (4.0 - 6.0) and at a temperature of 50C. The enzyme was stable at temperatures up to 40C. At -20C the enzyme was stable for at least 6 months. The KM values for Mn+2 and H2O2 at pH 4.5 and 40C were 19.2 and 16,8 M, respectively. The enzyme was strictly dependent of Mn+2 for oxidizing phenolic and non-phenolic compounds. It showed high activity and stability in the presence of organic solvents such as acetone, ethanol, acetonitrile and isopropanol, and was able to decolorize the anthraquinonic dye Remazol Brilliant Blue R and the azo dye Congo red in the presence of 1M Na2SO4 and NaCl. The properties presented by P. pulmonarius manganese peroxidase certainly make this enzyme a good agent for textile dye effluents treatment. The objectives of the second article was to evaluate the antimicrobial activities of mycelial extracts of Pleurotus pulmonarius obtained in submerged cultures using glucose, starch and cassava bagasse as carbon source. The highest antimicrobial activities were obtained after 6 days of cultivation using glucose and starch as carbon source. Despite the efforts, it was not possible to identify how molecules are responsible for antimicrobial activity of P. pulmonarius mycelia extracts.
Data da defesa: 26/08/2016
Cdigo: vtls000227174
Informaes adicionais:
Idioma: mul
Data de Publicao: 2016
Local de Publicao: Maring, PR
Orientador: Prof. Dr. Rosane Marina Peralta
Instituio: Universidade Estadual de Maring . Centro de Cincias Biolgicas . Programa de Ps-graduao em Cincias Biolgicas
Nvel: Tese (doutorado em Cincias Biolgicas)
UEM: Departamento de Bioqumica

Responsavel: edson
Categoria: Aplicao
Formato: Documento PDF
Arquivo: TESE FINAL.pdf
Tamanho: 951 Kb (973830 bytes)
Criado: 21-11-2017 20:28
Atualizado: 21-11-2017 20:38
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